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康寧基質膠的使用方法

發布日期: 2022-04-02
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基底膜是以細胞為基礎的薄層細胞外基質。康寧基質膠是從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取的基底膜基質,其中含有約 60%層粘連蛋白、30% IV 膠原和 8%的巢蛋白。康寧基質膠還含有基底膜聚糖、TGF-ß、表皮生長因子、類胰島素生長因子、組織纖溶酶原及其他生長因子。
一、使用方法
薄層凝膠法
1.依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管,將康寧基底膜基質混合至均勻。
2.將培養板放置在冰上,以 50 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質。
3.將培養板放置在 37 °C ,30 分鐘。
4.如果有必要的話,請在使用無血清培養基輕柔漂洗前吸出未結合的材料。請確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面。培養板現在可以使用了。
厚層凝膠法
1.依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管,將康寧基底膜基質混合至均勻。
2.將培養板放置在冰上。向康寧基底膜基質中加入細胞并使用預冷的移液管懸浮。以150-200 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質。
3.將培養板放置在 37°C,30 分鐘。現在可以添加培養基了。細胞也可以培養在這一凝膠的頂部。
薄層包被法
1.依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質。使用預冷的移液管,將康寧基底膜基質混合至均勻。
2.使用無血清培養基將康寧基底膜基質稀釋到需要的濃度。對于您的應用程序,您應該完成以經驗為主的研究來確定您的最適包被濃度。
3.向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質。加入的量應該足以容易地覆蓋整個生長表面。在室溫下培養 1 個小時。
4.吸出未結合的材料并使用無血清培養基輕柔地漂洗。培養板現在可以使用了。
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